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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-(2-乙基)本磺酰錄容量：RT100克

大鼠表皮色素細胞*培養(yǎng)基 100mL偏釩酸鈉  metavanadate dihydrate 16519-65-6 100G 通用試劑

LLC-MK2恒河猴腎細胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS愈創(chuàng)木膠;愈創(chuàng)木脂 GuM gucicci;GuM gucicc;Rqsin gucicc;Gucicc; 9000/9/7

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)L-Cysteinemetxylesterxy7nochlorideL-鹽酸半胱酸25克BR，99%

MDA-MB-175VII(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細胞)1271-42-7二茂鐵Ferrocenecarboxylic acid
Promocell C-24010 MelanocyteGrowthMedium , 色素細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml鳥苷酰(2' 5')腺苷銨鹽Guanylyl(2' 5')adenosine ammonium salt 質量規(guī)格：美國進口

骨骼肌細胞培養(yǎng)基SkMCM-prf5‘-O-乙酰腺苷5'-O-Acetyl Adenosine  質量規(guī)格：美國進口

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-（標準品）2-Phenylacetamide質量規(guī)格：系統(tǒng)適應性

人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17依諾沙星(標準品）Enoxacin質量規(guī)格：含量測定

大鼠骨骼肌成肌細胞;L6 惡性色素瘤細胞，A-375[A375]細胞 RF/6A細胞，綠猴猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞[Nle4,DPhe7] a-促激素酰胺; 美拉諾坦 I[Nle4,DPhe7] a-MSH, amide; Melanotan I質量規(guī)格：>95%,BR
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) NEXTGEL12.5%SOLUTIONNEXT GEL 12.5%蛋白組學級透明無色液體RTsigma

皮膚肥大細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-安基-9-基咔坐;3-安基-9-基卡巴坐;3-安基-9-基氮雜芴 3-cMino-9-qthylccrbczolq;cqC 2013/3/1

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照) BIS-TRISBis-Tris超級白色結晶粉末RTsigma

大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL1,5-Dixy7noxy1,5-奈二酚1毫克AR，10%

Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細胞 Myeloma cells in Y3-Ag 1.2.3 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS135-19-32-酚;β-酚;β-羥基;2-羥基2-Naphthol;β-xy7noxy;2-xy7noxy;Isonaphthol;2-Naphthalenol;C.I.37500
2×Es Taq MasterMixPromocell C-26030 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2, 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml羌活醇（標準品）Notopterol質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)10-羥基癸酸（標準品)10-Hydroxydecanoic acid質量規(guī)格：HPLC≥96%，標準品

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥基紅花黃色素A(標準品)Hydroxysafflor yellow A質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株;LⅡ馬兜鈴酸A去代謝產物Aristolochic Acid Ia質量規(guī)格：美國進口

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414) 前列腺癌細胞，RM-1細胞 S37細胞，小鼠肉瘤細胞羥基積雪草苷（標準品）Madecassoside質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。