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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
MCF-7/ER36細胞，人癌細胞 小鼠瘤β細胞(NOD/Lt轉基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1細胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞敵草腈(標準品)質量規格：分析標準品Dichlobenil

MKN-28(人胃癌高轉移細胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇苯(標準品)質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪細胞培養基PAM乙二醇苯(standard for GC,≥99.5%(GC))質量規格：standard for GC,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

CL-0399NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞)5×106cells/瓶×2O-芐基-L-酪氨酸芐酯鹽酸鹽質量規格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester

EPHA7 Others Rat 大鼠 EphA7 / EHK3 人細胞裂解液 (陽性對照) O-芐基-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽質量規格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester
P19細胞，畸胎癌細胞 人感染HCV肝癌細胞,HuH7-HCV細胞 CL-0224SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 )5×106cells/瓶×24,4'-二氨基二苯甲酮(>98.0%(T))4,4'-Diaminobenzophenone質量規格：>98.0%(T)

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E14,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC))4,4'-Dichlorobenzophenone質量規格：>99.0%(GC)

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,2-二琥珀酸(>99%,BR)2,2-Dimethylsuccinic acid質量規格：>99%,BR

肝實質細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2,7-二羥基萘(>98%,BR)2,7-Dihydroxynaphthalene質量規格：>98%,BR

ADIPOQ Others Human 人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 人細胞裂解液 (陽性對照) 2, 6-二氯醌-4-氯亞胺(>98%,BR)2,6-Dichloroquinone-4-chlorimide質量規格：>98%,BR
IMR-32(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×21,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))質量規格：>98.0%(HPLC)(N)1,1'-Dinaphthylamine

Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮細胞生長培養基(即用型) 500ml2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)2,2'-Dinaphthylamine

人星形膠質細胞裂解物HAL1,2'-二萘胺(升華精制品)(>98.0%(HPLC)(N))質量規格：>98.0%(HPLC)(N)1,2'-Dinaphthylamine (purified by sublimation)

HBEGF Others Human 人 HBEGF / D 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)  N,N',N''-三苯基-1,3,5-苯三胺(>98.0%(HPLC)(T))質量規格：>98.0%(HPLC)(T)N,N',N''-Triphenyl-1,3,5-benzenetriamine

人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]3-吲哚乙酸(IAA)質量規格：>98%,BR3-Indoleacetic acid
200bp DNA ladderCL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2皮質甾酮(標準品)Corticosterone質量規格：HPLC>97.0%,標準品

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞二硫化四乙基秋蘭姆Disulfiram質量規格：>97%

人肺轉化細胞;AE1201 人肝竇內皮細胞*培養基 100mL雙硫侖(標準品)Disulfiram質量規格：HPLC>99%,標準品

人主動脈平滑肌細胞RNAHASMC miRNA5 μg楊梅素/楊梅酮Myricetin質量規格：HPLC>95.0%,BR

PTPRA Others Human 人 PTPRA / PTPalpha (aa 174-793) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 楊梅素/楊梅酮（標準品）Myricetin質量規格：HPLC>98.0%,標準品
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。