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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養基100mL碳酸二苯酯(>99.0%(GC))質量規格：>99.0%(GC)Diphenyl Carbonate

TE-10細胞，人食管癌細胞 人腦膠質母細胞瘤細胞,TG-905細胞 家貓皮膚細胞;FCA-S1二芐基亞砜(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)Dibenzyl Sulfoxide

Calu-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇二苯(>99.0%(GC))質量規格：>99.0%(GC)Ethylene Glycol Diphenyl Ether

PTPRC Others Human 人 CD45 人細胞裂解液 (陽性對照) 十六碳酰胺(>95.0%(GC))質量規格：>95.0%(GC)Hexadec*

小鼠前胃癌細胞;MFC己酮可可堿（標準品）質量規格：含量測定Pentoxifylline
SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1鈷粉(>99%，BR)質量規格：>99%，BRCobaltous powder

大鼠中腦縫神經細胞(腦脊)(RNr)(1×106)銅粉(>99.5%,BR)質量規格：>99.5%,BRCopper powder

CM-H040人結腸粘膜上皮細胞*培養基100mL三亞乙基硫代1酰胺質量規格：>98%,BRTriethylenethiophosphoramide

正常小鼠Leydig細胞;TM3 小鼠頸上皮細胞*培養基 100mL普拉克索堿質量規格：>98.5%Pramipexole Base

RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 Rattus普拉克索堿（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Pramipexole Base
人絨毛膜內皮細胞西羅莫司，英文名或英文縮寫：Rapamycin，級別：BR，85%，規格：2KU

人胚腎細胞;293 Cells, low passage 人心室肌細胞*培養基 100mL聯本酰 Bqnzil 134-81-6

人肺成纖維細胞RNAHPF miRNA5 μg尿苷-5′-單嶙酸，英文名或英文縮寫：U 5′-P，級別：BR，98%，規格：50毫克

IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 正十三烷，英文名或英文縮寫：Tridecane，級別：SP，98.5%，規格：5克

小香豬皮膚細胞;SSC-S2MTT 250mg/500mg/1g Amresco分裝
α-淀粉酶AMS測試盒人臍靜脈平滑肌細胞RNAHUVSMC miRNA5 μg己二酸二乙酯(>99.0%(GC))Diethyl Adipate質量規格：>99.0%(GC)

大鼠海馬趾星形膠質細胞(RAh)(5×105)己二酸二異癸酯Diisodecyl Adipate質量規格：

恒河猴腎細胞;LLC-MK2壬二酸雙(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC))Bis(2-ethylhexyl) Azelate質量規格：>75.0%(GC)

KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細胞*培養基 100mL己二酸二異丙酯(>99.0%(GC))Diisopropyl Adipate質量規格：>99.0%(GC)

MN-c, 小鼠皮質神經元 Mouse己二酸二丁酯(>99.0%(GC))Dibutyl Adipate質量規格：>99.0%(GC)
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。