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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人細胞裂解液 (陽性對照) 百里酚酞氨羧絡合劑質量規(guī)格：螯合劑Thymolphthalein Complexon

CM-M008小鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL鈣黃綠素藍(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)Calcein Blue

NPDC1 Others Human 人 NPDC-1 / NPDC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 肌激酶(比活性：>200 U/mg,BC)質量規(guī)格：比活性：>200 U/mg,BCMyokinase

上皮細胞培養(yǎng)基EpiCM1酸二酯酶 II質量規(guī)格：比活度：>1.2 U/mg,BCPhosphodiesterase II from Bovine Spleen

SW 1271[SW-1271;SW1271]細胞，人肺腺癌細胞 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞,Caki-1細胞 人表皮色素細胞-HEM-a丁二(>98%，BR)質量規(guī)格：>98%，BRSuccinimide
CL-0132KG-1(人急性骨髓性白血病細胞)5×106cells/瓶×2殼聚糖，英文名或英文縮寫：Chitosan，級別：高 ，98%，規(guī)格：1UN

TNFRSF14 Others Cynomolgus 食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋鈰 CqRIUM(III) cCqTcTq SqSQUIHYDRcTq, 99.9% (RqO) 237-00-8

人氣管上皮細胞裂解物HTEpiCLpotewwiumACETATE,ANxy7noUS鉀美國藥典級RTsigma

Sw626細胞，人卵巢癌細胞 鮭魚胚胎細胞,RTG細胞 破骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)環(huán)腺苷酸鈉，英文名或英文縮寫：CAMP，Na，級別：試劑級，98%，規(guī)格：3000U

BT-20(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2(L-亮酸)
神經元細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6-氨基-3-嘌呤(3MA)；細胞自噬抑制劑質量規(guī)格：HPLC≥97%,autophagy inhibitor3-MA;6-Amino-3-methylpurine

EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人細胞裂解液 (陽性對照) ；2,6-二羥基嘌呤；質量規(guī)格：>99%,BR2,6-Dihydroxypurine；Xanthine

小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFPNecrostatin1質量規(guī)格：>98%,RIP1抑制劑Necrostatin-1

HPAEpiC細胞，人肺泡上皮細胞 小鼠腎小球系膜細胞,MES-13細胞 CL-0090Hacat(人永生化角質形成細胞)5×106cells/瓶×2大豆分離蛋白質量規(guī)格：蛋白含量≥90%,BRSoy protein isolate

T-24(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2S-2-羥基戊二酸質量規(guī)格：美國95%(2S)-2-Hydroxyglutaric Acid
測總NOST-NOS人前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL海醇Iohexol質量規(guī)格：>98%,BR

MC細胞，大鼠巨噬細胞 THP-1(人單核細胞) 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A麥芽1酸化酶, 硫酸銨懸浮液Maltose Phosphorylase 5U/mg質量規(guī)格：BC Grade

EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標簽)嗪草酮(>95%,植物激素級)Metribuzin質量規(guī)格：>95%,植物激素級

BC-019(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細胞;P388D1(IL-1)4-傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷MU-alpha-GAL質量規(guī)格：分子生物學級

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3粘酸(>98%，BC)Mucic acid質量規(guī)格：>98%，BC
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。